产品货号：
KD3128
中文名称：
5×DNA退火缓冲液
英文名称：
5×DNA Annealing buffer
产品规格：
1mL|5mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
保存：-20℃
产品说明：
5×DNA退火缓冲液不仅可以用于常规的DNA oligo的退火，而且特别适合于较难退火的用于RNAi (也称siRNA)质粒构建的DNA oligo的退火。用于RNAi质粒构建的DNA oligo通常由于含有约20个左右的互补序列，极易自身形成发夹结构，从而影响两条DNA oligo的正确退火。
5×DNA退火缓冲液可以有效避免DNA oligo自身形成发夹结构，并且两条oligo退火后可以直接和经酶切、纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。
操作说明：
1.把待退火的DNA oligo用经灭菌的Milli-Q水或重蒸水配制成50μM。溶解5×DNA退火缓冲液，混匀备用。
2.如下设置退火反应体系：
按照上述顺序依次加入各种试剂，混匀。如果所用的PCR仪没有热盖，滴加矿物油(mineral oil)以防止蒸发。
3.如下设置PCR仪进行退火反应：
注1：如果所用的PCR仪不具备下降0.1℃的功能，也可以设置为每90秒下降1℃。
4.退火结束后可以直接用于连接反应，也可以-20℃冻存备用。如果退火结束后打算进行酶切等其它反应，最好用纯化试剂盒进行纯化，或者确保退火产物在反应体系中体积不超过5%，以避免Annealing Buffer对后续的酶反应体系的干扰。
注意事项：
1．使用本试剂盒操作非常简单，只需把待退火的DNA oligo和Annealing Buffer for DNA Oligos (5X)按照一定比例混合后，置于PCR仪上，约90分钟即可完成。
2．如果一次退火反应体积为100微升，一个包装的退火缓冲液可以进行50次退火反应。
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